O sequenciamento didesóxi, ou sequenciamento de Sanger (nome
do cientista que inventou o método), utiliza a DNA-polimerase com nucleotídeos
terminadores de cadeia, chamados de didesoxirribonucleosídeos trifosfato
(esquerda), para fazer cópias parciais do fragmento de DNA a ser sequenciado.
Esses ddNTPs são derivados dos desoxirribonucleosídeos trifosfato normais que
não têm o grupo hidroxila 3. Quando incorporado em uma fita crescente de DNA,
eles bloqueiam o alongamento daquela fita.