Seção: P5. Análises in silico: contagem das leituras mapeadas no genoma de referência. | RCB0300 – Tópicos em Biotecnologia III - 2022 | e-Disciplinas

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P5. Análises in silico: contagem das leituras mapeadas no genoma de referência.

  • P5. Análises in silico: contagem das leituras mapeadas no genoma de referência.

    Data: 30 de Março (8:00 - 10:00)

    Professores: Pablo R. Sanches, Nilce M. Rossi e Aparecida M. Fontes

    Objetivos: ao longo da abordagem deste tópico os alunos deverão ser capazes de:

    • Manipular algoritmos de contagem de reads (leituras) mapeados em cada gene.


    Conceitos abordados:

    • Normalização: como os genes se expressam diferencialmente em diferentes condições
    • Normalização RNA-seq: comprimento das diferentes moléculas de RNAs; profundidade do sequenciamento de diferentes bibliotecas e composição de RNA
    • Renomear arquivos Gene counts no Galaxy
    • DESeq2 (normalização e calculo da expressão diferencial) --> tratamento vs. controle
    • Obtenção dos resultados: 
    • PCA
    • Distância entre amostras
    • Dispersão
    • Histograma de p valor
    • Genes significativamente DE
    • Tabelas de genes significativamente DE