Esta cinase é ativada por danos ao DNA e, em seguida, transduz o sinal. O CHK1 reage a quebras de DNA de fita simples (ss) geradas em resposta ao estresse genotóxico ou erros de replicação durante a fase S ou em garfos de replicação estagnados. As lesões de ssDNA são recobertas pela proteína de replicação A (RPA) e são reconhecidas pelo ATR que, por sua vez, fosforila CHK1, resultando em sua ativação. Isso facilita a interrupção do ciclo celular e o reparo de danos ao DNA.